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熒光定量PCR的服務(wù)項(xiàng)目

更新時(shí)間:2014-10-13 點(diǎn)擊次數(shù):2686次
 
  
  熒光定量PCR技術(shù)是通過(guò)熒光染料或熒光標(biāo)記的特異性探針,對(duì)PCR產(chǎn)物進(jìn)行標(biāo)記跟蹤,實(shí)時(shí)監(jiān)控反應(yīng)過(guò)程。隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行,反應(yīng)產(chǎn)物不斷累積,熒光信號(hào)強(qiáng)度也等比例增加。每經(jīng)過(guò)一個(gè)循環(huán),收集一次熒光強(qiáng)度信號(hào),這樣就可以通過(guò)熒光強(qiáng)度變化監(jiān)測(cè)產(chǎn)物量的變化,結(jié)合相應(yīng)的軟件對(duì)產(chǎn)物進(jìn)行分析,可以得到熒光擴(kuò)增曲線,計(jì)算待測(cè)樣品初始模版的量。實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)是一次由定性技術(shù)向定量技術(shù)的飛躍,運(yùn)用該項(xiàng)技術(shù),可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行相對(duì)定量、定量和定性分析。
  
  服務(wù)項(xiàng)目
  
  1.相對(duì)定量
  
  包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄和擴(kuò)增,采用SYBRGreenI法和TaqMan探針?lè)▋煞N方式,一般采用2-ΔΔCt法進(jìn)行計(jì)算。每個(gè)樣本重復(fù)三次,一般情況我公司提供內(nèi)參基因引物。
  
  2.定量
  
  需要制備標(biāo)準(zhǔn)品并建立標(biāo)準(zhǔn)曲線,然后檢測(cè)目的樣本中的基因,比對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線得到基因準(zhǔn)確拷貝數(shù)。